猪伪狂犬病会造成严重的高死亡率,猪场该如何有效防控?
猪伪狂犬病(PR)又称奥耶斯基氏病,是由PRV引起的高度传染性疾病。PRV可以感染很多哺乳动物,包括猪、牛、羊、人类等,能够造成严重的临床症状和高死亡率。2011年在我国出现PRV变异,对养猪业造成巨大的经济损失。
PRV的病原学及在我国流行情况
01、PRV的病原学
PRV属于α疱疹病毒,对外界环境抵抗力较强,在37℃下的半衰期为7 h,8℃可存活46 d,在25℃干草、树皮、食物上可存活10 d-30 d。PRV在pH值4-9间保持稳定,5%石炭酸2 min灭活,0.5%-1%氢氧化钠迅速使其灭活,对乙醚、氯仿、福尔马林、紫外线灯敏感。
02、PRV在我国的流行情况
1947年在中国东部省份家猫身上分离到PRV,后来在猪、牛、山羊等动物体内也分离到PRV。由于缺乏准确的检测技术及生物安全措施,PRV在1980s前中国猪场广泛流行,Bartha-K61弱毒疫苗的广泛应用,使得PRV的流行得到控制。
2011年,免疫Bartha-K61弱毒苗的猪场爆发PR,新生仔猪的死亡率达到50%以上。经过病原分析,与经典PRV相比,新流行的PRV出现变异,Bartha-K61弱毒苗不能对变异的PRV提供完全保护(An et al.2013; Luo et al.2014; Tong et al.2015)。
2011年-2020年PRV在中国的流行情况见下图,9个省的PRV血清 gE阳性率超过30%,中东部省份的阳性率高于东北,PRV gE的阳性率与饲养模式、季节、猪的品种等有关(Lei et al.2021)。小猪场PRV血清 gE阳性率比中大型猪场和集团猪场的高,gE阳性率受疫苗免疫情况、猪场海拔高度的影响(Wu et al.2018)。
PRV可以分为两个基因亚型(见下图),GⅠ在欧洲、美国、中国广泛流行,GⅡ在亚洲分离到,是我国流行的优势毒株(He et al.2019)。
在我国出现了重组PRV,分离到两个重组PRV毒株(FJ-W2和FJ-ZXF),gB属于GⅠ,gC、gD、gE属于GⅡ(Zhai et al.2019)。从四川分离到的PRV FJ62的gB与从日本分离到的MY-1的同源性100%,gC、gD、gE与中国分离的变异毒株的同源性分别为99.5%、99.9%、99.9%,FJ62是由PRV GⅠ(来自日本)和GⅡ(来自中国)重组而来(Huang et al.2020)。
PRV的危害
01、PRV威胁人类健康
自从PRV在1902年被分离到,PRV是否可以感染人类一直存在争议。尽管有报道称PRV感染人类可导致发热、虚弱、吞咽困难,但是还没有直接证据证明这些症状时因为感染PRV造成的(Anusz et al.1992; Skinner et al.2001)。
在2017年7月,通过NGS和PCR方法分析,中国江西省出现第一例人感染PRV病例,病人出现发热、头疼、视觉缺陷等症状(Ai et al.2018)。到现在,已经出现很多人类感染PRV的病例,有的人出现失明、死亡(Wang Y et al.2019; Yang X et al.2019; Wang et al.2020)。所有的病例都从事与猪有关的工作,包括饲养、兽医、屠宰等,大多数在参与这些工作时出现伤口,并表现相似的临床症状,包括癫痫、发热、头疼、呼吸困难、失明等。
02、PRV可感染其他动物
PRV可以感染不同的哺乳动物,并且具有一些共同的特征,包括皮肤瘙痒,一些区域的充血、出血等(Sun Y et al.2018; Cheng et al.2019; Lian et al.2020)。老虎、野猪也能感染PRV(Li et al.2014; Qin et al.2015)。食草动物感染PRV可能因为附近有管理水平低下的猪场的存在,老鼠将猪场中存在的PRV带到食草动物(Cheng et al.2019)。食肉动物(狐狸、狗、貂等)的感染可能是因为吃了感染PRV的生肉或未煮熟的肉(Liu et al.2017; Jin et al.2016; Lian et al.2020)。
03、PRV可造成猪严重的临床症状
哺乳仔猪:最敏感,15日龄内的哺乳仔猪常表现为最急型,病程不超过72h,主要表现为体温升高、拉稀,神经症状明显,表现为肌肉抽搐、震颤、麻痹继而出现共济失调,新生仔猪死亡率100%。
育肥猪:大多数伴有体温升高,食欲减退,出现不同程度的呼吸道症状,一般不发生死亡,长期隐性感染带毒、排毒。
成年猪:不表现临床症状或轻微体温升高,死亡率低。
怀孕母猪:妊娠60d以上流产,死胎与木乃伊大小不一,母猪有短暂的发热;妊娠后期感染产死胎、弱仔,弱仔有伪狂犬病的症状和病理变化。后备母猪不发情、屡配不孕。
PRV的诊断技术
传统临床诊断方法和病理学诊断方法已经不能准确诊断目前的猪伪狂犬病。近十年,许多新的诊断方法被用来诊断猪伪狂犬病,包括PRV特异性抗体血清学检测技术、检测PRV核酸的分子生物学技术。
血清学检测的主要方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、血清中和试验(SNT)、直接免疫荧光法(DFM),相对于其他方法,ELISA更简单、更灵敏,针对gB和gE的竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)在中国应用最广泛。
除了cELISA,其他更经济、灵敏度高、特异性强的血清学检测方法被应用。还没有建立统一的标准比较这些血清学检测方法的特点,因此,新的ELISA方法(阻断ELISA、间接ELISA、间接免疫荧光抗体试验)和竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)常进行灵敏度和特异性的比较,在诊断PRV野毒感染和疫苗免疫方面,新的血清学诊断方法阻断荧光侧向流动免疫分析具有更高的灵敏度,并能节省时间。
为增强对PRV糖蛋白(gE、gC、gD、gB、gG等)检测的特异性和灵敏性,PCR、RT-PCR、LAMP等方法被应用。PCR被广泛应用用来检测PRV野毒的存在、PRV的基因类型及gE缺失毒株。多重PCR被用来同步检测PRV和其他病原(Li et al.2019)。新一代基因测序技术(NGS)被用来检测人类感染PRV(Ai et al.2018)。
除了上面描述的方法,病原的直接检测是非常有效的方法,包括病原分离、血清学分析、分子生物学、电子显微镜技术。
PR的防控策略
01、规范生物安全
切断传染源,做好猪场内外的生物安全,禁止外来车辆、人员等入内;严格消毒制度,包括对猪群、猪舍、用具、环境等消毒;对病死猪、胎衣等无害化处理;做好猪场灭鼠工作。
02、严格引种管理
猪感染PRV后存在潜伏感染的隐性带毒猪,猪场应该坚持自繁自养。确实需要引种,为防止引种导致PRV的传入,要重视引种管理,可通过加强检疫,采用“检测-隔离-再检测”的方式,选择PRV gE阴性的种猪。引种后,在本场隔离28天以上,再次检测gE抗体,确认阴性后方可混群。
03、加强抗体检测
对不同日龄的仔猪、经产母猪、种公猪检测gE抗体,判断伪狂犬野毒感染情况,适时调整免疫程序。
04、实施净化措施
建立完善的免疫程序,淘汰阳性种猪,建立无感染的健康猪群,并做到全进全出,建立严格的生物安全措施,严格种猪引种防疫制度。
05、重视疫苗免疫
正确选择疫苗,制定科学免疫程序。疫苗毒Bartha-K61、Ea、Fa属于经典毒株,Bartha-K61疫苗对当前流行的PRV变异毒株不能提供完全的保护(Hu D et al.2015; Tong et al.2015);Ea、Fa这两种毒株的疫苗及基于这两种毒株的疫苗在中国得到大量的应用,但是能否对变异毒株PRV提供完全保护还不明确(Sun et al.2016)。gE和gI双基因缺失灭活苗(JS-2012-ΔgE/gI株)是变异毒株,免疫仔猪和母猪能产生高水平的中和抗体,能有效抵抗伪狂犬变异毒株(JS-2012)的攻击(Tong et al.2015)。
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